抑癌基因DNA甲基化状态与银屑病的关系

银屑病是一种常见的红斑鳞屑性皮肤病，常反复发作，其确切病因至今尚不清楚，涉及遗传、免疫、炎症、细胞增殖与凋亡等多方面因素。目前认为，银屑病是遗传因素与环境因素等多种因素相互作用的多基因遗传病，免疫介导是其主要发病机制。银屑病病理生理的一个重要特点是表皮基底层角质形成细胞增殖加速，丝状分裂周期缩短为37.5小时，表皮更替时间缩短为3一4天，组织病理出现角化不全，颗粒层消失。

近年来，银屑病发病机制的研究重点从T细胞转移到了自身免疫，所有已知的免疫指标在银屑病皮损中都呈高度表达状态。4至少有9个可能的基因位点已经被确认（PSORSI一9），还有一个银屑病关节炎的易感基因位点（PSORASl）。

然而，确切的基因和它们的功能还没有被证实。目前公认的是PSORSl可能实际就是等位基因HLA一Cw*06编码分子HLA一Cw06。目前银屑病和HLA基因相关性已经得到了证实，只有一部分易感基因的携带者会发展为银屑病，这提示除了HLA基因的作用外，一些环境因素也参与了银屑病的发病机制过程。

1、银屑病与DNA甲基化关系的假说

表观遗传学主要研究DNA序列不发生变化时，基因表达异常的机制，以及这种改变又是如何在有丝分裂和减数分裂过程中遗传给后代。和传统遗传学最大的不同点在于，发生表观遗传改变的基因其甲基化状态是可逆的。

DNA甲基化是指DNA在甲基转移酶催化下，由S一腺昔甲硫氨酸提供甲基，在胞嚓陡的5位碳原子加上一个甲基基团，形成5一甲基胞嚓。这一反应主要发生在CpG岛（CpGisland）区域。DNA甲基化状态往往与基因表达相关，表达活跃的基因常处于非甲基化状态，而表达不活跃的基因往往处于甲基化状态。

目前研究发现，乳腺癌、肝癌、前列腺肿瘤都不同程度地受到表观遗传修饰的影响。“银屑病的表皮角质形成细胞增殖加速，考虑其与某些基因的甲基化状态改变可能相关。通过对银屑病患者基因甲基化状态的检测，可以帮助阐明银屑病的发病机制。目前，国内外对银屑病基因甲基化检测的工作刚刚起步，已经完成的有抑癌基因p16,p14和p210.

2、检测方法

目前，已经完成的银屑病易感基因DNA甲基化的检测方法都采用了甲基化特异性的PCR（Methyla-tion一specificPCR,MS一PCR），它是将DNA先用重亚硫酸盐处理，未甲基化的胞嚓pig转变为尿嚓pig，而甲基化的不发生变化，随后进行引物特异性PCR。

在MS一PCR中设计两对引物，并要求:（1）引物末端均设计至检测位点结束;（2）两对引物分别只能与重亚硫酸盐处理后的序列互补配对，即一对结合处理后的甲基化DNA链，另一对结合处理后的非甲基化DNA链。

最后，检测MS一PCR扩增产物，如果用针对处理后甲基化DNA链的引物能扩增出片段，则说明该被检测的位点存在甲基化;若用针对处理后的非甲基化DNA链的引物能扩增出片段，则说明被检测的位点不存在甲基化。

3银屑病相关基因的甲基化状态

3.1、p16基因p16基因是定位于9p21的多种肿瘤抑制基因（MIS1），能够抑制细胞周期依赖激酶（CDK4/CDK6）介导的Rb基因蛋白产物的磷酸化。非磷酸化的Rb可结合到转录因子E2F一DNA复合物上，在启动子区域阻断mRNA的转录，同时又活化转录因子ATF一2，促进细胞分裂抑制因子的转录。

p16基因端启动子区域的CpG岛过度甲基化，可导致基因失活，无法正常转录，从而失去对细胞分裂G1期的阻滞调控而导致细胞过度增殖。