介绍尖锐湿疣的基因检查方法

通过基因技术来进行疾病的诊断是最为准确的。现在对于像尖锐湿疣这种性病，我们也有了较为成熟的基因检查方法，通过基因检查方法我们就可以准确确诊尖锐湿疣。虽然基因检查法并不是最简单的方法，但却绝对是最准确的方法。

（一）标本的采集及处理

1.标本的采集和预处理：用刮板或生理盐水浸润的棉棒从阴道和宫颈外口取分泌物和细胞。在作细胞学检查的同时，将标本放入5ml含有0.05%硫柳汞的PBS中，用PBS离心（3000g，10min）洗涤2次，沉积细胞重悬于1mlPBS中，取0.5ml细胞悬液抽提。

2.标本核酸的提取：按1体积细胞悬液加10倍体积的细胞裂解液（10mmol/LTris-HCl，pH7.4，10mmol/LEDTA，150mmol/LNaCl，0.4%SDS，1.0mg/ml蛋白酶K）37℃下处理过夜;且等体积酚/氯仿（1:1），氯仿/异戊醇（24:1）各抽提2次;加1/10体积3mol/LNaAc（pH5.2）及2.5倍体积无水乙醇置-20℃2h或过夜沉淀DNA;加1体积乙醇洗涤1次;用60μl含RNA酶（100μg/ml）的TE液（10mmol/LTris-HCl，pH8.0，1.0mmol/LEDTA）溶解DNA，37℃温育。

（二）PCR扩增

1.引物设计和合成：HPV基因组可分为早期区（E）和晚期区（L），每区含一系列开放读码框架（ORF）。序列分析表明，各型HPV的非编码区及E1、E6、E7和L1区均有保守序列。Manos等从HPVL1区中选择保守序列设计合成引物MY11和MY09见表1，该引物与HPV6、11、16、18及33型有互补序列，也可扩增其它型。

2.PCR反应试剂：TaqDNA聚合酶（2U/ml）、10mmol/LdNTP贮备液（dATP、dCTP、dGTP、dTTP各10mmol/L），10×PCR缓冲液（500mmolKCl、40mmol/LMgCl2、100mmol/LTris-HCl、pH8.5），100μmol/LMY11和MY09贮备液，灭菌的玻璃蒸馏器制备的蒸馏水。

上面所描述的就是基因技术检查尖锐湿疣的过程，可能对于一般人来说了解这个过程并没有什么太大的意义。但其实对于病情的检查和治疗，我们多知道一些总比少知道一些要强，特别是像尖锐湿疣这种性病，多了解就为治疗多增加了一份保障。