弥漫大b细胞淋巴瘤诊断方法是什么

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弥漫大b细胞淋巴瘤诊断方法：

1、眼观：标本为3小块灰白色组织，总体积3.5cm×2.5cm×1cm，质软。

2、镜检：淋巴结组织有被膜及残存的淋巴窦与淋巴滤泡，但大部区域已被弥漫分布的瘤细胞取代，瘤内可见宽窄不一、束状排列、玻璃样变性的纤维束把瘤组织分隔成不规则片块状、小团状或穿插于瘤细胞之间（图2）。细胞主要有2种：透明细胞与非透明细胞。前者占多数，细胞较大，长径10～15μm，胞浆透明，核大、圆形或卵圆形及不规则形，核膜清晰，染色质粗颗粒状，核中央可见嗜酸性小核仁，核分裂象10～12/10hpf;后者胞浆稀少，胞界不清，核圆或不规则，染色较深，偶见核仁及核裂，类似中心或中心母细胞。个别瘤细胞有双核或分叶核。不少区域瘤细胞已有片状坏死或间质水肿，还可见瘤细胞围绕血管呈内皮下浸润性生长。

3、免疫组化：10%中性缓冲福尔马林溶液固定标本，石蜡切片，采用迈新公司及dako公司试剂，二步法染色（envisionsystem）。瘤细胞lca（+），l26（+）（图4），其余uchl-1、kp-1、cd15、cd30、κ、λ、bcl-2、iga、igm、ck、ebv等皆为（-）、ki-67指数>80%。

4、基因重排：用10%中性缓冲福尔马林固定的石蜡包埋组织提取dna、采用半巢式（semi-nested）pcr扩增法对瘤细胞进行igh基因克隆性重排检测，引物第一轮为fr3a和ljh、第二轮为fr3a和vljh，并用宫颈原发性b细胞淋巴瘤作阳性对照，以淋巴细胞反应性增生作阴性对照，结果见图5，在目标基因范围内（100～120bp）出现明显的dna扩增条带。tcr-β基因重排为阴性。

5、dna测定：石蜡切片，feulgen染色，采用华东理工大学与上海医科大学共同研究制的ims型图像分析综合系统进行瘤细胞dna测定（图6），示超二倍体，dna指数2.07，平均dna质量13.34pg，s期细胞23.76%。

6、病理诊断：右锁骨上淋巴结大b细胞淋巴瘤，结合临床可符合来自原发性纵隔大b细胞淋巴瘤。lca（+）、l26（+），igh基因克隆性重排、ki-67指数>80%、dna为超二倍体。

原发性纵隔大b细胞淋巴瘤（pmlbl），最早出现在70年代初两篇有关纵隔淋巴瘤文献中〔1〕，到80年代才被确立为特殊的临床病理类型（specificclinicopathologicentity），至1996年文献上约有300例记载〔2〕，虽然在real分类方案内已列为一特殊类型，但在1999年abou-eella〔3〕比较了43例pmlbl与352例非纵隔大b淋巴瘤认为除了发病年龄、性别、部位、大小外两者无明显差异，他们主张pmlbl只能作为一种临床综合征，若要作为一特殊疾病类型必须进一步研究。

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